ビスホスホネートを含む医薬組成物

专利摘要:
本発明は、１つまたはそれ以上の生体適合性ポリマーと共に形成される、ビスホスホネートの水難溶性塩を含むデポ剤、そのようなビスホスホネートの水難溶性塩、その遊離化合物およびその塩の結晶形、並びに他の関連態様に関し、ここで、該化合物は、式（Ｉ）：［式中、Ｒ１およびＲ２は、明細書中に記載した通りである。］のものである。開示中に述べた式（Ｉ）の化合物およびそれらの形態は、骨関連障害および癌の処置に有用である。
公开号:JP2011516455A
申请号:JP2011502387
申请日:2009-04-02
公开日:2011-05-26
发明作者:カレン・ベルツ；フィリップ・ルステンベルガー；ホルガー・ペーターゼン
申请人:ノバルティス アーゲー；
IPC主号:A61K31-4164

专利说明:

[0001] 発明の属する技術分野
本発明は、１つまたはそれ以上の生体適合性ポリマーと共に形成される、ビスホスホネートの水難溶性塩（以下、難溶性塩ともまた呼ばれ、水に溶解し難いことを意味する。）を含むデポ剤に関する。そのデポ剤は、微粒子またはインプラントの形態であり得る。そのデポ剤は、様々な、例えば、骨関連および／または増殖性疾患、とりわけ変性疾患並びに関節リウマチおよび変形性関節症の処置および予防に有用である。]
[0002] さらなる態様において、本発明は、ある種のビスホスホネートの新規塩(該塩の新規結晶形を含む)、ならびに、遊離（例えば、双性イオン）型でのビスホスホネートの新規結晶形に関する。]
[0003] さらに、様々な他の態様（使用、方法、製造に関する工程または方法、および関連事項）は、本発明の態様である。]
背景技術

[0004] 発明の背景
ビスホスホネートは、骨吸収が増加する様々な良性および悪性疾患の両方において、破骨細胞活性を阻害するために広く使用されている。これまでのところ、水溶性ビスホスホネート（例えば、ナトリウム塩）のみが医薬組成物において使用されてきた。注入用溶液を形成する場合には、これが合理的な方法である。しかしながら、デポ剤の場合には、ビスホスホネートの高い水溶性が高い初期放出をもたらして、重篤な局所組織刺激を引き起こすであろう。]
[0005] 例えば、ゾレドロン酸薬物は、骨に関係する進行悪性腫瘍といったような、例えば、骨およびカルシウム代謝に関係する、様々な疾患または障害をもつ患者での、とりわけ、病的骨折、脊椎圧迫、骨に対する放射線照射もしくは手術、または腫瘍誘発性高カルシウム血症といったような、骨格関連事象の予防、腫瘍誘発性高カルシウム血症、パジェット病の処置、股関節骨折の手術および予防等において使用される。]
[0006] 発明の概要
本発明により、驚いたことに、新規クラスのビスホスホネートである水難溶性ビスホスホネートが、薬物放出が非常に上手く制御されるよう、大変効率良くカプセル化され得ることが見い出された。]
[0007] 水難溶性塩の利点の１つは、一般的に使用されるエマルジョン−溶媒蒸発／抽出法によって微粒子を製造する間、高水溶性塩が水相へと溶解され得ることから、一般に、原体のカプセル化が改善されることである。さらなる利点は、もしその原体が高水溶性塩に比べて限られた水溶性を有するならば、得られるデポ剤からの薬物放出が、一般に、より良く制御されることである。]
[0008] 原体の微粒子化の利点は、マトリックスにおいて部分的にしかカプセル化され得ずに、原体の無制御放出をもたらす大きな原体粒子と比べた、ポリマーマトリックスにおける原体粒子のより完全なカプセル化である。]
[0009] 加えて、新たな塩は、前述の製剤の製造を可能にすることが見い出された。]
[0010] さらに、幾つかのビスホスホネートおよびそれらの塩（水和物または他の溶媒和物が含まれる。）の新規結晶形が見い出され、そして本発明の一態様である。]
図面の簡単な説明

[0011] 図１は、結晶性双性イオン（内部）塩である[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸（化合物Ａ）のＸ線回折図(diffractogram)を示す（詳細に関しては、実施例６を参照。）。
図２は、結晶性Ｃa塩である化合物Ａ（１：２）のＸ線回折図(diffractogram)を示す（詳細に関しては、実施例７を参照。）。
図３は、結晶性Ｍg塩である化合物Ａ（１：２）のＸ線回折図(diffractogram)を示す（詳細に関しては、実施例８を参照。）。
図４は、結晶性Ｚn塩である化合物Ａ（１：２）のＸ線回折図(diffractogram)を示す（詳細に関しては、実施例９を参照。）。] 図１ 図２ 図３ 図４
[0012] 発明の詳細な説明
次の発明の詳細な説明では、ある態様において一般用語を規定するより具体的な定義がまた、他の態様において一般用語をより具体的に定義するのに使用されてもよく、このことは、本発明のより具体的な態様を成す。ただし、各々の用語は、本発明の態様を定義する他の一般用語とは独立して置き換えられ得る。]
[0013] 本発明は、第一態様において、式Ｉのビスホスホネートの水難溶性塩を生体適合性ポリマーと共に含むデポ剤に関する。]
[0014] 本発明は、このことに関して、とりわけ、１つまたはそれ以上の生体適合性ポリマーと共に形成される、ビスホスホネートの水難溶性塩を含むデポ剤に関し、ここで、該ビスホスホネート化合物は、式Ｉ：



［式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であって、他方は、水難溶性塩の形態である分岐しているまたは分岐していないＣ１−Ｃ５−アルキル（好ましくは、Ｃ２−Ｃ５−アルキル）である。］
の化合物から選択される化合物である。]
[0015] Ｒ１およびＲ２の一方が水素であって、他方がメチルであり、水難溶性塩の形態である、式Ｉのビスホスホネートのデポ剤が好ましい。あるいはまた、Ｒ１およびＲ２の一方が水素であって、他方がエチルであり、水難溶性塩の形態である、式Ｉのビスホスホネートのデポ剤が非常に好ましい。]
[0016] [２−(５−メチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸、またはさらに好ましくは、水難溶性塩の形態での[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸という名称をもつ、式Ｉのビスホスホネートのデポ剤が最も好ましい。]
[0017] 式Ｉの化合物の水難溶性塩、とりわけ、前段落で定義した式Ｉの好ましい化合物での塩もまた、それ自体が、とりわけ、以下により詳細に記載する具体的な多形（結晶形または結晶変態）の形態で、本発明の一態様である。]
[0018] “難溶性の”という語は、本明細書中で使用するときはいつでも、溶解度が２１〜２４℃の温度で水に２mg／ml、さらに好ましくは、該温度で１mg／ml（水）未満であることを意味する。]
[0019] 本発明は、とりわけ、式Ｉのビスホスホネートの水難溶性塩を、１つまたは好ましくはそれ以上の生体適合性ポリマー、好ましくは生分解性ポリマーと共に含む、微粒子の形態でのデポ剤に関する。]
[0020] 本発明はまた、式Ｉのビスホスホネートの水難溶性塩を、１つまたは好ましくはそれ以上の生体適合性ポリマー、好ましくは生分解性ポリマーと共に含むインプラントにも関する。]
[0021] 本発明は、以下により詳細に提示するような、骨代謝回転異常が見られる疾患または障害の処置および予防のための方法であって、そのような処置を必要とする患者に、式Ｉの化合物の遊離型（またはその内部塩、例えば、双性イオン塩）のデポ剤または難溶性塩もしくは結晶形を治療上有効な投薬量で投与することを含む方法、さらにはまた、そのような疾患または障害の処置のための薬物の製造における、式Ｉの化合物の遊離型（またはその内部塩、例えば、双性イオン塩）のデポ剤または難溶性塩もしくは結晶形の使用、並びに該障害または疾患の処置におけるそれらの使用、さらにはまた、そのような処置における使用のための、式Ｉの化合物の遊離型（またはその内部塩、例えば、双性イオン塩）のデポ剤または難溶性塩もしくは結晶形に関する。]
[0022] 本発明の一態様である、または本発明によるデポ剤の一部である、式Ｉの化合物の水難溶性塩は、カルシウム、マグネシウムおよび亜鉛塩、または好ましくは、１：１もしくはとりわけ１：２塩（本明細書中で述べる場合はいつでも、（金属イオン）：（式Ｉの化合物）のモル比を記しており、ここで、“金属”は、カルシウム、マグネシウムおよび／または（とりわけ、“または”）亜鉛を示す。）としての、これらの塩の２つもしくは全ての混合物から選択される。これらの塩は、水溶性が低く、言い換えれば、水難溶性とは、その水溶性が、対応するナトリウム塩の２５％以下であることを意味する。]
[0023] 好ましくは、本発明のデポ剤は、活性成分として、式Ｉの化合物、好ましくは、[２−(５−メチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸、もしくはとりわけ、[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸のみを、その水難溶性塩の形態で、または[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸と名付けられた式Ｉの化合物の結晶形を遊離（例えば、とりわけ双性イオン）型で含む。]
[0024] 本発明による製剤において、カルシウム塩は、亜鉛塩より良くポリマー−カプセル化されることが見い出されている − 従って、式Ｉの化合物のカルシウム塩は、一般に、とりわけデポ剤に関して、より好ましい。]
[0025] 加えて、式Ｉの化合物の遊離化合物、さらにはまた、その塩の両方の定義された結晶形は、各々、付加的利点、例えば、それらの成分と、水和物といったような溶媒和物が形成される場合には、溶媒分子との間の一定の化学量論的(stochiometric)関係、マイクロメートル範囲の粒子を得るための良好な粉砕性(millability)、良好な流動性、そしてまた改善された貯蔵性(storability)も含め、そのような物質の医薬品製剤への加工を容易にする無定形(amorphic)物質に勝る他の有利な結晶特性を示す。]
[0026] 好ましくは、本発明の微粒子は、式Ｉの化合物を、カルシウム塩、なおさらに好ましくは、[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸のカルシウム塩の形態で含む。]
[0027] 式Ｉのビスホスホネートは、微粒子製剤のデポ乾燥重量の重量で、約１％〜約６０％、より通常は約２％〜約２０％、好ましくは約５％〜約１０％の量で存在するのがよい。]
[0028] 本発明のビスホスホネートは、本発明のデポ剤から、また本発明の組成物から、数週間、例えば、約２週間〜１８ヶ月（例えば、３週間〜１２ヶ月）にわたり放出される。]
[0029] 好ましくは、デポ剤を製造するのに使用される、その水難溶性塩の形態での式Ｉのビスホスホネートは、約０.１ミクロン〜約１５ミクロン、好ましく約５ミクロン未満、なおさらに好ましくは約３ミクロン未満の粒径を（例えば、その範囲内の粒子重量の９０％、好ましくは９８％で）有する、微粒子化技術（例えば、ジェット粉砕または高圧均質化）のいずれかの手法により製造される、非常に微細な粉末である。原体を微粒子化することで、カプセル化効率が改善されることが見い出されている。]
[0030] 一態様により、本発明は、とりわけ、１つのカルシウムに対し２分子の式Ｉの化合物（１：２塩）という化学量論をもつ式Ｉの化合物のカルシウム塩、とりわけ、化合物Ａ（＝[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸）のカルシウム塩を提供する。]
[0031] 別の態様により、本発明は、とりわけ、１つの亜鉛に対し２分子の式Ｉの化合物（１：２塩）または１つの亜鉛に対し１分子(two molecules)の式Ｉの化合物（１：１塩）という化学量論をもつ式Ｉの化合物の亜鉛塩、とりわけ、化合物Ａ（＝[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸）の亜鉛塩を提供する。]
[0032] またさらに別の態様により、本発明は、とりわけ、１つのマグネシウムに対し２分子の式Ｉの化合物（１：２塩）という化学量論をもつ式Ｉの化合物のマグネシウム塩、とりわけ、化合物Ａ（＝[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸）のマグネシウム塩を提供する。]
[0033] さらにまた、驚いたことに、遊離型（この用語には、常に、双性イオン型といったような内部塩が含まれる。）での式Ｉの化合物、さらにはまた、式Ｉの化合物の塩は、多形型（種々の結晶変態）で存在し得ることが見い出されている。]
[0034] 従って、さらなる態様において、本発明は、式Ｉの化合物またはそれらの遊離（例えば、双性イオン）型の、とりわけ、[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸（以下、化合物Ａ）の、低水溶性塩の新規結晶形、これらの結晶形の製造方法、これらの結晶形を含む組成物、および温血動物、とりわけヒトの診断法または治療処置におけるこれらの結晶形の使用に関する。]
[0035] 遊離型並びに塩形態は両方とも、各々、結晶形で、溶媒を含まないか、または（とりわけ、塩の場合には）溶媒和物、例えば、水和物の形態（例えば、二水和物として）であるのがよい。]
[0036] 結晶形に関して、本発明は、第一態様において、式Ｉの化合物の遊離型の結晶形または塩形態（とりわけ、水和物の形態での塩）の結晶形を提供する。]
[0037] さらに焦点を絞った態様において、本発明は、化合物Ａの遊離双性イオン型の結晶形を提供し、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図１に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：１０.５、１３.１、１４.７、１７.２、２３.５、２５.２および２９.２（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、遊離双性イオン型での化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す。] 図１
[0038] 別のさらに焦点を絞った態様において、本発明は、１つのカルシウムに対し２分子の化合物Ａという化学量論をもつ（とりわけ、二水和物といったような水和物の形態での）化合物Ａのカルシウム塩の結晶形を提供し、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図２に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：７.９、１０.６、１２.１、２５.７、２７.４および２９.２（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、カルシウム１：２塩である化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す。] 図２
[0039] またさらに別のさらに焦点を絞った態様において、本発明は、１つの亜鉛に対し２分子の化合物Ａという化学量論をもつ（とりわけ、二水和物といったような水和物の形態での）化合物Ａの亜鉛塩の結晶形を提供し、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図３に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：６.７、９.５、１２.５、１７.７および２７.３（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、亜鉛１：２塩である化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す。] 図３
[0040] またさらに別のさらに焦点を絞った態様において、本発明は、１つのマグネシウムに対し２分子の化合物Ａという化学量論をもつ（とりわけ、二水和物といったような水和物の形態での）化合物Ａのマグネシウム塩の結晶形を提供し、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図４に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：６.７、１２.５、２０.０および２７.３（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、マグネシウム１：２塩である化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す。] 図４
[0041] 上述の、また特許請求の範囲で述べるＸ線データ検索のためのパラメーターおよび装置は、好ましくは、以下に実施例で述べるものと一致する。]
[0042] 本発明の別の態様により、本発明は、とりわけ、上述の本発明の焦点を絞った態様のいずれかに記載した、式Ｉの化合物またはその難溶性塩、とりわけカルシウム塩（カルシウム：化合物Ａ＝１：２であるのがとりわけ好ましく、とりわけ、水和物、例えば、二水和物の形態での）の結晶形、またとりわけ非経口投与のための、少なくとも１つの薬学的に許容され得る担体が含まれる医薬品製剤（とりわけ、本明細書中に記載するデポ剤）を提供する。]
[0043] またさらに別の態様において、本発明は、とりわけ、骨代謝回転異常が見られる、１つまたはそれ以上の疾患または障害の処置（“処置”という用語には、本開示中で使用するときはいつでも、予防的および治療的（例えば、対症的または治癒的）処置の両方が含まれる。）において使用するための、亜鉛、（とりわけ）マグネシウムおよび（さらにとりわけ）カルシウム塩から選択される難溶性塩の形態での、式Ｉの化合物、とりわけ化合物Ａの非晶形または結晶形（とりわけ、ここで、金属イオンに対する式Ｉの化合物の化学量論は１：２である。）；あるいはとりわけ、その遊離（例えば、内部双性イオン）型での、または（とりわけ１：１、またはさらにとりわけ１：２）亜鉛、（とりわけ）マグネシウムもしくは（さらにとりわけ）カルシウム塩の形態での、各々、とりわけ水和物の形態での（例えば、二水和物の形態での）、または２つもしくはそれ以上のそのような形態の混合物での、式Ｉの化合物の結晶形に関する。]
[0044] “約”という語は、本明細書中で使用する場合、とりわけ、“約”の後に述べた数字がその絶対値の±１０％まで変動し得ることを意味する。]
[0045] 式Ｉのビスホスホネートの水難溶性塩の粒径分布は、薬物の放出特性に影響し得る。典型的には、粒径が小さければ小さいほど、初期拡散段階の間（例えば、最初の２０日間）のバーストおよび放出は低い。好ましくは、粒径分布は、例えば、×１０＜２ミクロン（すなわち、１０％の粒子が２ミクロンより小さい。）；×５０＜５ミクロン（すなわち、５０％の粒子が５ミクロンより小さい。）；または×９０＜１０ミクロン（すなわち、９０％の粒子が１０ミクロンより小さい。）である。]
[0046] II．微粒子
適当な媒体に懸濁させた、生体適合性の薬理学的に許容され得るポリマー、好ましくは生分解性の薬理学的に許容され得るポリマーに組み込まれた式Ｉのビスホスホネートの低溶性塩を含む微粒子の投与は、長期間、例えば、１週間〜１８ヶ月、好ましくは約３週間〜約１２ヶ月にわたり、活性薬剤の放出を与えることが見い出されている。]
[0047] 別の態様において、本発明は、
（ｉ）次のことを含む内部有機相の製造：
（ia）ポリマーまたはポリマー類を適当な有機溶媒または溶媒混合物に溶解して、場合により、空隙率影響物質(porosity-influencing agent)を段階（ia）で得られた溶液に溶解する／分散させること、または
−塩基性塩を段階（ia）で得られた溶液に加えること、
−界面活性剤を段階（ia）で得られた溶液に加えること；
（ib）式Ｉの化合物の水難溶性塩を段階（ia）で得られたポリマー溶液に懸濁させるか、または式Ｉの化合物の水難溶性塩を段階（ia）で使用する溶媒と混合できる溶媒に溶解して、該溶液をポリマー溶液と混合するか、または式Ｉの化合物の水難溶性塩をポリマー溶液に直接溶解すること；
（ii）次のことを含む外部水相の製造：
（iia）緩衝液を調製して、そのpＨを３.０−８.０（例えば、pＨ ３.０−５.０）に調節すること；例えば、酢酸緩衝液、および
（iib）安定剤を段階（iia）で得られた溶液に溶解すること；
（iii）例えば、高い剪断力を発生させる装置で（例えば、タービンまたは静的ミキサーで）内部有機相を外部水相と混合して、エマルジョンを形成させること；そして
（iv）微粒子を溶媒蒸発または溶媒抽出により硬化させ、場合により、加えて、その微粒子を、例えば、水で洗浄して、その微粒子を集めて、例えば、凍結乾燥または減圧下での乾燥により乾燥させること；
を含む、本発明の微粒子の製造方法を提供する。]
[0048] ポリマーのために適当な有機溶媒には、例えば、酢酸エチルもしくはハロゲン化炭化水素（例えば、塩化メチレン、クロロホルム）、または例えば、それらの２つもしくはそれ以上の混合物が含まれる。]
[0049] 段階（iib）に関して適当な安定剤の例には、次のものが含まれる：
ａ）好ましくは、約１０,０００Ｄa〜約１５０,０００Ｄa（例えば、約３０,０００Ｄa）の重量平均分子量を有するポリビニルアルコール（ＰＶＡ）。便宜上、ポリビニルアルコールは、２０℃で４％水溶液として、またはＤＩＮ ５３０１５により測定した場合、約３mＰa s〜約９mＰa sの動粘性計数をもつ低粘性を有する。適当には、ポリビニルアルコールは、ポリ酢酸ビニルを加水分解することから得ることができる。好ましくは、ポリ酢酸ビニルの含量は、ポリビニルアルコールの約１０％〜約９０％である。便宜上、加水分解度は、約８５％〜約８９％である。典型的には、残留アセチル含量は、約１０−１２％である。好ましいブランドには、Kuraray Specialities Europe, GmbHから入手可能なMowiol（商標）４−８８、８−８８および１８−８８が含まれる。]
[0050] 好ましくは、ポリビニルアルコールは、外部水相の体積の重量で、約０.１％〜約５％（例えば、約０.５％）の量で存在する。]
[0051] ｂ）例えば、各々、セルロースのエチレンオキシドおよびプロピレンオキシドとの反応により形成されるヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）および／またはヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）。ＨＥＣおよびＨＰＣは、広範囲の粘性タイプにおいて利用可能であり；好ましくは、粘性が中程度である。好ましいブランドには、Hercules Inc.製のNatrosol（商標）、例えば、Hercules Inc.製のNatrosol（商標）２５０ＭＲおよびKlucel（商標）が含まれる。]
[0052] 好ましくは、ＨＥＣおよび／またはＨＰＣは、外部水相の体積の重量で、約０.０１％〜約５％（例えば、約０.５％）の総量で存在する。]
[0053] ｃ）例えば、適当には、約２,０００Ｄa〜２０,０００Ｄaの間の分子量をもつポリビニルピロリドン(Polyvinylpyrolidone)。適当な例には、約２,５００Ｄaの平均分子量をもつポビドンＫ１２Ｆ、約８,０００Ｄaの平均分子量をもつポビドン Ｋ１５、または約１０,０００Ｄaの平均分子量をもつポビドン Ｋ１７として一般に知られているものが含まれる。好ましくは、ポリビニルピロリドン(Polyvinylpyrolidone)は、外部水相の体積の重量で、約０.１％〜約５０％（例えば、１０％）の量で存在する。]
[0054] ｄ）ゼラチン、好ましくは、豚または魚ゼラチン。便宜上、ゼラチンは、２０℃で１０％溶液に関して、約２５cps〜約３５cpsの粘度を有する。典型的には、１０％ 溶液のpＨは、約６〜約７である。適当なブランドは、高分子量、例えば、Norland Products Inc、クランブリー、ニュージャージー州、アメリカ合衆国から入手可能なNorland高分子量魚ゼラチンを有する。]
[0055] 好ましくは、ゼラチンは、外部水相の体積の重量で、約０.０１％〜約５％（例えば、約０.５％）の量で存在する。]
[0056] 好ましくは、ポリビニルアルコールを使用する。好ましくは、ゼラチンは使用しない。好ましくは、微粒子はゼラチンを含まない。]
[0057] 得られる微粒子は、数サブミクロン〜数ミリメートルの直径を有するのがよく；例えば、注射針の通過を容易とするために、例えば、最大で、例えば、５−２００ミクロン、好ましくは５−１３０ミクロン、さらに好ましくは５−１００ミクロンの直径となるよう努める。狭い粒径分布が好ましい。例えば、粒径分布は、例えば、１０％＜２０ミクロン、５０％＜５０ミクロンまたは９０％＜８０ミクロンであるのがよい。]
[0058] 微粒子および単位用量の含量均一性は優れている。単位用量は、理論的用量の約２０％〜約１２５％、例えば、約７０％〜約１１５％、例えば、約９０％〜約１１０％、または約９５％〜約１０５％と様々に製造され得る。]
[0059] 乾燥状態での微粒子は、抗凝集剤を用いて、例えば、混合され、例えば、コーティングされ得るか、または例えば、予め充填されたシリンジもしくはバイアルにおいて、抗凝集剤の層で覆われ得る。]
[0060] 適当な抗凝集剤には、例えば、マンニトール、グルコース、デキストロース、スクロース、塩化ナトリウム、または例えば、先に記載した特性をもつ、ポリビニルピロリドンもしくはポリエチレングリコールといったような水溶性ポリマーが含まれる。]
[0061] 好ましくは、抗凝集剤は、微粒子の重量で、約０.１％〜約１０％（例えば、約４％）の量で存在する。]
[0062] （通常、皮下(s.c.)または筋肉内(i.m)）投与前、微粒子を注射に適当な媒体に懸濁させる。]
[0063] 従って、本発明はさらに、本発明の微粒子を媒体中に含む医薬組成物を提供する。その媒体は、場合により、
ａ）１つまたはそれ以上の湿潤剤；および／または
ｂ）１つまたはそれ以上の等張化剤；および／または
ｃ）１つまたはそれ以上の粘度増加物質；
をさらに含み得る。]
[0064] 好ましくは、その媒体は水性であり、例えば、それは、水（例えば、脱イオン水）、また場合により、pＨを７−７.５に調節するための緩衝液（例えば、Ｎa２ＨＰＯ４およびＫＨ２ＰＯ４の混合物といったようなリン酸緩衝液）、並びに先に示したような１つまたはそれ以上の薬剤ａ）、ｂ）および／またはｃ）を含み得る。]
[0065] しかしながら、水を媒体として使用する場合、本発明の微粒子を懸濁させてはならず、また水相上部に浮遊させるのがよい。水性媒体に懸濁させるべき本発明の微粒子の能力を改善するために、その媒体は、好ましくは、湿潤剤ａ）を含む。湿潤剤は、媒体中の微粒子の迅速かつ適当な懸濁性(suspendibility)を与えるよう選択される。好ましくは、その微粒子が媒体により迅速に湿潤されて、その中で懸濁液を迅速に形成する。]
[0066] 本発明の微粒子を水性媒体に懸濁させるのに適当な湿潤剤には、ポロクサマー、またはポリオキシエチレン−ソルビタン−脂肪酸エステルといったような、非イオン性界面活性剤が含まれ、この特徴は、先に記載されている。湿潤剤の混合物を使用するのがよい。好ましくは、その湿潤剤は、Pluronic Ｆ６８、Tween ２０および／またはTween ８０を含む。]
[0067] 湿潤剤または湿潤剤類は、投与すべき組成物の重量で、約０.０１％〜約１％、好ましくは０.０１−０.５％にて存在するのがよく、また約０.０１−５mg／mL（媒体）（例えば、約２mg／mL）にて存在するのがよい。]
[0068] 好ましくは、その媒体は、マンニトール、塩化ナトリウム、グルコース、デキストロース、スクロースまたはグリセリンといったような、等張化剤ｂ）をさらに含む。好ましくは、等張化剤はマンニトールである。]
[0069] 等張化剤の量は、投与すべき組成物の等張性を調節するよう選択される。例えば、上述の凝集を減少させるよう、等張化剤が微粒子内に含まれる場合、等張化剤の量は、両方の合計として理解されるべきである。例えば、マンニトールは、好ましくは、投与すべき組成物の重量で、約１％〜約５％、好ましくは約４.５％であるのがよい。]
[0070] 好ましくは、その媒体は、粘度増加物質ｃ）をさらに含む。適当な粘度増加物質には、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎa）、ソルビトール、ポリビニルピロリドン、またはモノステアリン酸アルミニウムが含まれる。]
[0071] 便宜上、低粘性をもつＣＭＣ−Ｎaが使用され得る。態様は、先に記載した通りであり得る。典型的には、低分子量をもつＣＭＣ−Ｎaが使用される。その粘度は、スピンドル１を６０rpmで備えたBrookfield ＬＶＴ粘度計において、１％（ｗ／ｖ）水溶液として２５℃で測定した場合、約１mＰa s〜約３０mＰa s（例えば、約１０mＰa s〜約１５mＰa s）であるのがよく、またはＮaＣＭＣ ７ＬＦ（低分子量）の溶液に関しては、０.１−１％ 水溶液として、１−１５mＰa*sの粘度であるのがよい。
先に記載した特性を有するポリビニルピロリドンが使用され得る。]
[0072] 粘度増加物質、例えば、ＣＭＣ−Ｎaは、例えば、媒体中、約１mg／mL〜約３０mg／mL（例えば、約７mg／mLまたは約１７.５mg／mL）の濃度にて、媒体の（体積で）約０.１％〜約２％（例えば、約０.７％または約１.７５％）の量で存在するのがよい。]
[0073] さらなる態様において、本発明は、本発明の微粒子および本発明の媒体を含むキットを提供する。例えば、そのキットは、例えば、以下に記載する、正確な量の、投与すべき本発明の化合物を含有する微粒子、および約１mL〜約５mL（例えば、約２mL）の本発明の媒体を含むのがよい。]
[0074] 一態様において、場合により、抗凝集剤と混合した乾燥微粒子を、容器、例えば、バイアルまたはシリンジへと充填して、例えば、γ線照射を使用して、滅菌するのがよい。（通常、皮下(s.c.)または筋肉内(i.m)）投与前、適当な媒体、例えば、先に記載した媒体を加えることにより、その微粒子を容器内で懸濁させるのがよい。例えば、場合により、抗凝集剤、粘度増加物質および／または等張化剤と混合した微粒子、並びに懸濁液用媒体を、ダブルチャンバーシリンジにて別々に収容するのがよい。微粒子の、抗凝集剤および／または粘度増加物質および／または等張化剤との混合物もまた、本発明の一部を成す。]
[0075] 別の態様において、無菌条件下、場合により、抗凝集剤と混合した乾燥滅菌微粒子を、適当な媒体、例えば、先に記載した媒体に懸濁させて、容器、例えば、バイアルまたはシリンジへと充填するのがよい。次いで、媒体である溶媒、例えば、水を、例えば、凍結乾燥または減圧下での蒸発により除去して、容器内に微粒子および媒体の固形成分の混合物をもたらすのがよい。投与前、適当な媒体、例えば、水、例えば、注入用水、または好ましくは低モル濃度のリン酸緩衝溶液を加えることにより、その微粒子および媒体の固形成分の混合物を容器内で懸濁させるのがよい。例えば、微粒子、場合により、抗凝集剤、および媒体の固形成分の混合物、並びに懸濁液用媒体（例えば、水）を、ダブルチャンバーシリンジにて別々に収容するのがよい。]
[0076] III．インプラント
生体適合性の薬理学的に許容され得るポリマーに組み込まれた式Ｉのビスホスホネートの難溶性塩を含むインプラントの投与は、長期間、例えば、１週間〜１８ヶ月、とりわけ約３週間〜約１２ヶ月（例えば、３ヶ月〜約１２ヶ月）にわたり、全てのまたは実質的には全ての活性薬剤の放出を与えることが見い出されている。従って、本発明の開示中、“デポ剤”という用語はまた、そのようなインプラントも示す。]
[0077] 別の態様において、本発明は、
（ｉ）両方の成分を一緒に液体窒素で凍結粉砕すること(cryo-milling)、および／または造粒段階のための有機溶媒を使用して、この溶媒を乾燥工程により再び除去することによる、水難溶性ＤＳおよび生分解性ポリマーの粉末混合物の製造；
（ii）ＲＡＭ押出機を、その粉末混合物で充填すること（あるいはまた、単軸または２軸スクリュー押出機を使用する。）；
（iii）その押出機の壁を、５０−１２０℃、ポリ(ラクチド−コ−グリコリド)をポリマーマトリックスとして使用する場合には、好ましくは６０−９０℃の範囲内の温度まで加熱すること；
（iv）溶融した粉末混合物を、直径１−４mmのピンホールに低速で、好ましくは、１.５mmのピンホールに５mm／分の速度で押し通すこと；そして
（ｖ）その結果得られる棒状物質を、予想用量に応じて、より短い長さ（例えば、２０mm）へと切断すること；
を含む、本発明のインプラントの製造方法を提供する。]
[0078] 適用のために、そのインプラントをアプリケーターまたはトロカールに入れ、アルミ箔で密封して、γ線照射を最小線量２５kＧyで使用することにより滅菌する。これらのアプリケーターは、例えば、Rexam Pharma、Sueddeutsche Feinmechanik GmbH（ＳＦＭ）またはBecton Dickersonにより市販されている。]
[0079] IV．生体適合性ポリマー
デポ剤のポリマーマトリックスは、合成または天然ポリマーであり得る。そのポリマーは、生分解性もしくは非生分解性、または生分解性および非生分解性ポリマーの組み合わせのいずれかであり、好ましくは生分解性であるのがよい。
“ポリマー”という語は、ホモポリマーまたはコポリマーを意味する。]
[0080] 適当なポリマーには、
（ａ）ポリオール部分（例えば、グルコース）から放射状に伸びる直鎖である直鎖状または分岐鎖状のポリエステル、例えば、Ｄ−、Ｌ−またはラセミポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、ポリアルキレンオキサレートといったようなポリエステル、クレブス回路（例えば、クエン酸回路）の酸のポリアルキレングリコールエステル等、またはその組み合わせ；
（ｂ）１,３−ビス−(p−カルボキシフェノキシ)−プロパンおよび二塩基酸（例えば、セバシン酸）のコポリマー、もしくはエルカ酸二量体のセバシン酸とのコポリマー；オルト−エステルのトリオール（例えば、１,２,６−ヘキサントリオール）との反応、もしくはジケテンアセタール（例えば、３,９−ジエチリデン−２,４,８,１０−テトラオキサスピロ[５,５]ウン−デカン）のジオール（例えば、１,６−ジヘキサンジオール、トリエチレングリコールもしくは１,１０−デカンジオール）との反応から結果的に生ずるポリオルトエステル；またはアミド−ジオールモノマーで得られるポリエステルアミド（例えば、１,２−ジ−(ヒドロキシアセトアミド)−エタンもしくは１,１０−ジ−(ヒドロキシアセトアミド)デカン）といったような、他のモノマーとのそのようなコポリマー（例えば、ポリ酸無水物）を含め、有機エーテル、無水物、アミドおよびオルトエステルのポリマーまたはコポリマー；
（ｃ）ポリビニルアルコール；
が含まれる。]
[0081] そのポリマーは、架橋結合していても、または架橋結合していなくてもよく、通常、５％以下、典型的には、１％未満であるのがよい。]
[0082] ポリラクチド−コ−グリコリドポリマー（ＰＬＧＡともまた名付けられている。）が好ましい。]
[0083] 表IIは、本発明のポリマーの例を記載する。]
[0084] 本発明の好ましいポリマーは、直鎖状のポリエステルおよび分岐鎖状のポリエステルである。直鎖状のポリエステルは、ラクトン二量体の縮合により、α−ヒドロキシカルボン酸（例えば、乳酸および／またはグリコール酸）から製造され得る。直鎖状または分岐鎖状（星形）のポリマーにおける好ましいポリエステル鎖は、α−カルボン酸部分、乳酸およびグリコール酸のコポリマー、またはラクトン二量体のコポリマーであり、本明細書中、ＰＬＧＡともまた呼ばれる。直鎖状または分岐鎖状のポリエステルにおけるポリラクチド−コ−グリコリドのラクチド：グリコリドのモル比は、好ましくは約１００：０〜４０：６０、さらに好ましくは９５：５〜５０：５０、最も好ましくは９５：５〜５５：４５である。]
[0085] 本発明により使用されるのが好ましい直鎖状のポリエステル、例えば、直鎖状のポリラクチド−コ−グリコリドは、約１０,０００Ｄa〜約５００,０００Ｄaの間（例えば、約５０,０００Ｄa）の重量平均分子量（Ｍw）を有する。そのようなポリマーは、例えば、１.２〜２の間の多分散度ＭＷ／Ｍｎを有する。適当な例には、例えば、一般式−[(Ｃ６Ｈ８Ｏ４)ｘ(Ｃ４Ｈ４Ｏ４)ｙ]ｎ−（ｘ、ｙおよびｎは各々、総合計が先に示したＭwを与えるような値を有する。）を有する、例えば、ポリ(Ｄ,Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド)、直鎖状のポリ(Ｄ,Ｌ−ラクチド)および直鎖状のポリ(Ｄ,Ｌ−ラクチド)遊離カルボン酸末端基、例えば、市販のもの、例えば、Boehringer Ingelheim製のResomer（商標）、Durect製のLactel（商標）、Purac製のPurasorb（商標）およびLakeshore製のMedisorb（商標）が含まれる。]
[0086] 本発明によりまた使用される分岐鎖状のポリエステル、例えば、分岐鎖状のポリラクチド−コ−グリコリドは、開始剤として、ポリヒドロキシ化合物、例えば、ポリオール（例えば、グルコースまたはマンニトール）を使用して製造され得る。ポリオールのこれらのエステルは既知であって、例えば、ＧＢ ２,１４５,４２２ Ｂ（この内容は、参照することにより本明細書中に組み込まれる。）に記載されている。ポリオールは、少なくとも３つのヒドロキシ基を含み、また２０,０００Ｄaまでの分子量を有し、ポリオールの、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、例えば、平均として３つのヒドロキシ基は、エステル基の形態であって、これは、ポリ−ラクチドまたはコ−ポリ−ラクチド鎖を含む。典型的には、０.２％のグルコースを使用して、重合を開始する。分岐鎖状のポリエステル（Ｇlu−ＰＬＧ）は、直鎖状のポリラクチド鎖の放射状構造をもつ中心グルコース部分を有し、例えば、それらは、星形構造を有する。]
[0087] 直鎖状のポリラクチド−コ−グリコリド鎖の放射状構造をもつ中心グルコース部分を有する分岐鎖状のポリエステル（Ｇlu−ＰＬＧ）は、触媒の存在下、ポリオールを高温でラクチドおよび好ましくはグリコリドともまた反応させることにより製造され得て、これは、開環重合を実行可能にする。]
[0088] 直鎖状のポリラクチド−コ−グリコリド鎖の放射状構造をもつ中心グルコース部分を有する分岐鎖状のポリエステル（Ｇlu−ＰＬＧ）は、好ましくは、約１０,０００−２００,０００、好ましくは２５,０００−１００,０００、とりわけ３５,０００−６０,０００の範囲内（例えば、約５０,０００Ｄa）の重量平均分子量Ｍw、また１.７〜３.０（例えば、２.０−２.５）の多分散度を有する。Ｍw ３５,０００またはＭw ６０,０００の星形ポリマーの固有粘度は、クロロホルム中、各々、０.３６dL／ｇまたは０.５１dL／ｇである。Ｍw ５２,０００を有する星形ポリマーは、クロロホルム中、０.４７５dl／ｇの粘度を有する。]
[0089] 本発明の化合物に関するポリマーの所望の分解速度および所望の放出特性は、モノマーの種類、ホモポリマーもしくはコポリマーかどうか、またはポリマーの混合物を使用するかどうかに応じて変化し得る。]
[0090] Ｖ．処置方法
本発明の使用および方法は、骨代謝回転異常（とりわけ、異常に増加する）が見られる疾患または障害、また、骨転移または過剰な骨吸収の発生を予防するまたは阻害するためにビスホスホネートを使用する悪性疾患も含め、様々な疾患の現存する治療法に対する改善、そしてまた、とりわけ、関節リウマチおよび変形性関節症といったような炎症性疾患の治療に関する改善を表す。新生血管を閉塞するためのビスホスホネートの使用は、適当な処置期間後、腫瘍（例えば、固形腫瘍）および転移(metastastes)（例えば、骨転移）の抑制、またなお、腫瘍（例えば、固形腫瘍）の大きさおよび転移（例えば、骨転移）の縮小をもたらすことが見い出されている。血管造影を使用して、新生血管は、ビスホスホネート処置後に消失するが、正常血管は、無傷のまま残存することが観察されている。さらに、閉塞された血管は、ビスホスホネート処置中止後に復元しないことが観察されている。そしてまた、骨転移、関節リウマチおよび変形性関節症の患者は、ビスホスホネート処置後に疼痛の減少を経験することも観察されている。]
[0091] 本発明により処置され得る骨代謝回転異常（例えば、異常に増加する）の状態には、（例えば、骨）癌に関連した骨代謝回転異常の処置、例えば、骨粗鬆症性骨折の危険性を低下させるための閉経後骨粗鬆症の処置；閉経後骨粗鬆症の予防、例えば、閉経後骨量減少の予防；男性骨粗鬆症の処置または予防；コルチコステロイド誘発性骨粗鬆症、および薬物療法（例えば、ジフェニルヒダントイン、甲状腺ホルモン補充療法）に続発するまたはそれによる他の形態の骨量減少の処置または予防；固定化および宇宙飛行と関連した骨量減少の処置または予防；関節リウマチ、骨形成不全症、甲状腺機能亢進症、神経性食欲不振症、臓器移植、人工関節の緩み、および他の医学的状態と関連した骨量減少の処置または予防が含まれる。例えば、そのような他の医学的状態には、関節リウマチにおける関節周囲骨びらんの処置または予防；変形性関節症の処置、例えば、肋軟骨下骨硬化症、肋軟骨下骨嚢胞、骨棘形成の予防／処置、また例えば、骨内圧の低下による変形性関節症疼痛の予防／処置；副甲状腺機能亢進症、甲状腺中毒症、サルコイドーシス、またはビタミンＤ過剰症に続発する過剰な骨吸収から結果的に生ずる高カルシウム血症、歯吸収性病変、先の状態のいずれかと関連した疼痛、特に骨減少症、パジェット病、骨粗鬆症、関節リウマチ、変形性関節症の処置または予防が含まれ得る。]
[0092] （ヒトおよび家畜への使用に）とりわけ有用であるのは、骨および関節の疾患と関連した骨代謝回転異常に関係する、１つまたはそれ以上の疾患（この用語には、状態または障害が含まれる。）、例えば、
−骨粗鬆症、骨減少症、骨髄炎、変形性関節症、関節リウマチ、骨髄浮腫、骨痛、反射性交感神経性ジストロフィー、強直性脊椎炎（別名モルブス・ベヒテレフ(Morbus Bechterev)）、骨パジェット病もしくは歯周病といったような良性状態；
−悪性腫瘍に伴う高カルシウム血症、固形腫瘍および血液悪性腫瘍と関連した骨転移といったような悪性状態；
−人工関節の緩み、人工関節の移動、インプラント固定、インプラントコーティング、骨折治癒、仮骨延長、脊椎固定、無血管性骨壊死、骨移植、骨代用材といったような整形外科的状態；
または２つもしくはそれ以上のそのような状態のいずれかの組み合わせの処置である。]
[0093] 本発明のデポ剤の適当な投薬量は、勿論、例えば、処置すべき状態（例えば、疾患の種類または耐性の性質）、使用する薬物、所望の効果、および投与方法に応じて変化するであろう。]
[0094] 具体的には、本発明によるデポ剤を用いて、満足のいく結果は、１ヶ月あたり注射１回につき、本発明の式Ｉの化合物（その遊離型に基づいて計算した。）のおよそ約０.２mg〜約１００mg、例えば、０.２mg〜約３５mg、好ましくは約３mg〜約１００mg、または１ヶ月あたり動物の体重１kgにつき、約０.０３mg〜約１.２mg、例えば、０.０３−０.３mgの投薬量での投与（例えば、非経口投与）で得られる。従って、患者に適当な月々の投薬量は、式Ｉの化合物（その遊離型に基づいて計算し、そしてまた、ここでは、その形態または塩および／もしくは結晶で使用する。）のおよそ約０.３mg〜約１００mgである。]
[0095] 遊離（例えば、双性イオン）型の結晶形としての式Ｉの化合物、または式Ｉの化合物の難溶性塩、またはとりわけ、本明細書中、先に記載した、また以下に記載する、そのような塩（そのような塩の溶媒和物、例えば、水和物、とりわけ二水和物が含まれる。）の結晶形を含む、さらに一般的な形態での医薬組成物は、温血動物への、経口といったような経腸、または直腸および非経口投与のためのものであり、その薬理学的活性成分は、単独で、または薬学的に適当な担体と共に存在する。]
[0096] これらのさらなる新規医薬組成物は、例えば、約０.０００１〜８０％、好ましくは約０.００１〜１０％の活性成分を含む。経腸または非経口投与のための医薬組成物は、例えば、糖衣錠剤、錠剤、カプセル剤または坐剤、さらにはまた、アンプル、バイアル、予め充填されたシリンジといったような投薬単位形態でのものである。これらの医薬組成物は、それ自体が既知の方法で、例えば、従来の混合、造粒、調製(confectioning)、溶解または凍結乾燥法により製造される。例えば、経口投与のための医薬組成物は、活性成分を固形担体と合わせ、場合により、その結果得られる混合物を造粒して、その混合物を加工するか、または粒状とし、所望または必要ならば、適当な賦形剤の添加後、錠剤または糖衣錠コアとすることにより得ることができる。]
[0097] 適当な担体は、特に、糖（例えば、ラクトース、サッカロース、マンニトールまたはソルビトール）、セルロース製剤および／またはリン酸カルシウム（例えば、リン酸三カルシウムまたは重リン酸カルシウム）といったような充填剤、そしてまた、デンプンペースト（例えば、トウモロコシ、コーン、コメまたはジャガイモデンプン）、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドンといったような結合剤、および／または、所望により、上述のデンプン、そしてまたカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸またはその塩（例えば、アルギン酸ナトリウム）といったような崩壊剤である。賦形剤は、特に、流動促進剤および滑沢剤、例えば、シリカ、タルカム、ステアリン酸もしくはその塩（例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウム）、および／またはポリエチレングリコールである。糖衣錠コアには、とりわけ、アラビアゴム、タルカム、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、適当な有機溶媒または溶媒の混合物中のセラック溶液を含んでいるのがよい濃縮糖溶液、胃液に抵抗性があるコーティングの製造に関しては、フタル酸アセチルセルロースまたはフタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロースといったような適当なセルロース製剤の溶液を使用して、胃液に抵抗性があり得る適当なコーティングが施される。例えば、活性成分の種々の用量を同定するまたは示すために、着色料または色素を錠剤または糖衣錠コーティングに加えることができる。]
[0098] 経口投与のためのさらなる医薬組成物は、ゼラチンまたはヒプロメロースから作られた乾燥充填カプセル剤、さらにはまた、ゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールまたはソルビトール）からなる軟密閉カプセル剤である。乾燥充填カプセル剤は、顆粒の形態での活性成分を、例えば、ラクトースといったような充填剤、デンプンといったような結合剤、および／またはタルカムもしくはステアリン酸マグネシウムといったような流動促進剤、また場合により、安定剤と混合して含み得る。軟カプセル剤では、活性成分を、脂肪油、パラフィンオイルまたは液体ポリエチレングリコールといったような適当な液体に溶解するかまたは懸濁させるのが好ましく、これにまた、安定剤を加えることもできる。]
[0099] 直腸投与に適当な医薬組成物は、例えば、活性成分の坐剤基剤との組み合わせからなる坐剤である。適当な坐剤基剤の例は、天然または合成トリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコールおよび高級アルカノールである。活性成分の基剤物質との組み合わせを含む、ゼラチン直腸カプセル剤を使用することもまた可能である。適当な基剤物質は、例えば、液体トリグリセリド、ポリエチレングリコールおよびパラフィン炭化水素である。]
[0100] 非経口投与に特に適当な（とりわけ好ましい）投薬形態は、水溶性型、例えば、水溶性塩での活性成分の水溶液である。その溶液は、無機もしくは有機酸または塩基で、pＨ 約４−９、または最も好ましくは約５.５−７.５の生理学的に許容され得るpＨ値に調節するのがよい。その溶液はさらに、塩化ナトリウムのような無機塩、または糖、糖アルコールもしくはアミノ酸のような有機化合物で、最も好ましくはマンニトールまたはグリセロールで等張化され得る。適当な組成物はまた、脂肪油（例えば、ゴマ油）もしくは合成脂肪酸エステル（例えば、オレイン酸エチルまたはトリグリセリド）といったような適当な親油性溶媒もしくは媒体が使用される、対応する油状注射懸濁液、または粘度を増加させる物質（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールおよび／またはデキストラン）、また場合により、安定剤もまた含む水性注射懸濁液といったような、活性成分の懸濁液でもある。]
[0101] 本発明はまた、好ましくは、炎症状態、主にカルシウム代謝障害と関連した疾患（例えば、リウマチ性疾患、また特に骨粗鬆症）の処置のための、式Ｉの化合物の形態（塩、結晶形、および／またはデポ剤が含まれる。）にも関する。]
[0102] ０.１μg／kg（体重）以下の非経口用量は、硬組織代謝に僅かだけ影響を及ぼす。長期毒性副作用は、１０００μg／kg（体重）以上の用量で起こり得る。本発明による式Ｉの化合物の形態は、等張液または高張液で、経口的に、さらにはまた、皮下に、筋肉内にまたは静脈内に投与することができる。好ましい一日用量は、経口投与に関しては約１〜１００mg／kgの範囲内、静脈内、皮下および筋肉内投与に関しては約２０〜５００μg／kgの範囲内である。]
[0103] しかしながら、式Ｉの化合物の形態の投薬量（式Ｉの化合物自体としての重量に基づく。）は変更可能であって、病気の性質および重症度といったような各々の状態、処置期間に、また各々の化合物に左右される。非経口（例えば、静脈内）投与のための投薬単位形態は、例えば、１０〜３００μg／kg（体重）、好ましくは１５〜１５０μg／kg（体重）含み；また経口投薬単位形態は、０.１〜５mg、好ましくは０.１５〜３mg／kg（体重）含む。経口投与に関して好ましい単回用量は１０〜２００mgであり、また静脈内投与に関しては１〜１０mgである。経口投与に関する高用量は、吸収が制限されるという理由から必要である。長期にわたる処置において、投薬量は、通常、所望の効果を維持するために、最初は高投薬量とした後、低レベルまで減少させることができる。非経口（例えば、静脈内または皮下）用量は、１〜５２回／年の一定間隔で断続的に投与するのがよい。経口用量は、毎日、週１回、月１回または年４回の投与計画で定期的に投与するのがよい。本発明によるデポ剤に関して、上述の投薬量が好ましい。]
[0104] 本発明のデポ剤、塩、結晶形および医薬組成物の特性は、例えば、次のような標準動物試験または臨床治験で試験され得る：
次の出版物（これらは各々、とりわけ、本明細書中、以下に述べるアッセイまたは方法の記述に関して、参照することにより本明細書中に組み込まれる。）は、式Ｉの化合物の有利な生物学的特徴を確認するために使用することができる、様々なアッセイおよび方法を記載する。]
[0105] （１）骨代謝回転および大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の生化学的マーカーにおける経時変化を解明するための、（２）静的および動的な組織形態計測的パラメーター、骨微細構造および機械的強度の変化を測定するための、そして（３）これらのパラメーターに対する式Ｉの化合物での慢性処置の予防効果を評価するための、閉経後骨粗鬆症に関するモデルとしての成熟卵巣切除（ＯＶＸ）ラットへの単回静脈内投与の効果は、Calcif. Tissue Int. (2003) 72, 519-527に記載されている通りに実証することができる。ここで、高活性を見い出すことができる。]
[0106] コラーゲン誘導関節炎（ＣＩＡ）のエフェクター段階の間のラットにおける、滑膜炎、構造的関節損傷、および骨代謝に対する式Ｉの化合物の効果（次の可能な生物学的アッセイの説明の記述において、これには、本明細書中に記載する、一方または両方の塩形態、さらにはまた、結晶形が含まれる。）は、ARTHRITIS & RHEUMATISM(2004), 50(7), 2338-2346において示されている通りに実証することができる。]
[0107] 骨内部成長に対する式Ｉの化合物の効果は、J. Bone Joint Surg. (2005), 87-B, 416-420に記載されている通りに、多孔質タンタルインプラントがイヌの尺骨内に両側的に埋め込まれた動物モデルにおいて調べることができる。]
[0108] マウスモデルにおける骨格腫瘍増殖の阻害は、J. Natl. Cancer. Inst. (2007), 99, 322-30に記載されている方法により実証することができる。]
[0109] ファルネシルピロリン酸合成酵素に結合した場合の式Ｉの化合物のＸ線構造は、Chem. Med. Chem. (2006), 1, 267-273に記載されている方法により、またはその方法と類似して得ることができる。４１kＤaのサブユニットのホモ二量体酵素であるヒトＦＰＰＳは、Ｃ５イソプレノイドであるジメチルアリルピロリン酸（ＤＭＡＰＰ）およびイソペンテニルピロリン酸からの、Ｃ１５代謝物であるファルネシルピロリン酸（ＦＰＰ）の二段階合成を触媒する。ＦＰＰは、ＲasおよびＲhoといったような必須ＧＴＰアーゼシグナルタンパク質の翻訳後プレニル化に必要であり、そしてまた、コレステロール、ドリコール、およびユビキノンの合成に関する前駆体でもある。]
[0110] 例えば、無細胞のインビトロアッセイにおいて、既知の化合物に対する式Ｉの化合物の優位性を示すことができる。簡単に言えば、その反応は、酵素および式Ｉの阻害剤の存在下に進行して、その反応生成物（ファルネシルピロリン酸）をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより定量化する。
詳細には、基質を加える前に、阻害剤および酵素を予めインキュベートしておく。]
[0111] そのアッセイは、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳに基づいたファルネシルピロリン酸合成酵素（ＦＰＰＳ）に関する無標識アッセイである。この方法は、インビトロでのタグ無し(untagged)ファルネシルピロリン酸（ＦＰＰ）を定量化し、そしてＦＰＰＳの阻害剤を見い出すためのハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）に、また候補化合物のＩＣ５０値の決定に適当である。分析時間は、２.５分の総サイクル時間で２.０分である。その分析は、結果的に１６時間の分析時間／プレートとなる３８４ウェルのプレートに関してフォーマットすることができる。]
[0112] 試薬：
ペンタノール、メタノール、およびイソプロピルアルコールは、ＨＰＬＣグレードであって、フィッシャー・サイエンティフィック(Fisher Scientific)から得られる。ＤＭＩＰＡは、シグマ−アルドリッチ(Sigma-Aldrich)から得られる。水は、イン−ハウス(in-house)ミリ−Ｑシステムから得られる。アッセイ緩衝液（２０mＭ ヘペス(ＨＥＰＥＳ)、５mＭ ＭgＣl２および１mＭ ＣaＣl２）は、シグマ−アルドリッチ(Sigma-Aldrich)から得られる１mＭ原液からの希釈により調製される。ゲラニルピロリン酸（ＧＰＰ）、イソプレニルピロリン酸（ＦＰＰ）、およびファルネシルＳ−チオロピロリン酸(farnesyl S-thiolopyrophosphate)（ＦＳＰＰ）の標準品は、Echelon Biosciences（ソルトレークシティー、ユタ州）から得られる。ヒトファルネシルピロリン酸合成酵素（ＦＰＰＳ、Swissprot) ＩＤ：Ｐ１４３２４）（１３.８mg／mL）は、Rondeauら（ChemMedChem 2006, 1, 267-273）により記載されている通りに製造される。]
[0113] アッセイ：
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析は、Agilent １１００バイナリーＬＣポンプ（Agilent Technologies, Inc.、サンタクララ、カリフォルニア州、アメリカ合衆国）に接続したMicromass Quattro Microタンデム四重極質量分析器（Waters Corp、ミルフォード、マサチューセッツ州、アメリカ合衆国）で行われる。注入は、２.５μLの注入ループサイズを使用して、ＣＴＣ分析用オートサンプラー（Leap Technologies Inc.、カーボロ、ノースカロライナ州、アメリカ合衆国）で行われる。クロマトグラフィーは、０.１％ＤＭＩＰＡ／メタノールを溶媒Ａとして、また０.１％ ＤＭＩＰＡ／水を溶媒Ｂとして（ＤＭＩＰＡは、ジメチルイソプロピルアミンである。）使用して、ガードカラムホルダー（Ｐ／Ｎ １８６０００２６２）に含まれるWaters ２.１×２０mmエクステラ(Xterra) ＭＳ Ｃ１８ ５μmのガードカラム（Ｐ／Ｎ １８６０００６５２）（Waters Corp、ミルフォード、マサチューセッツ州、アメリカ合衆国）で行われる。その勾配は、０.００〜０.３０分は５％ Ａ、０.３１分で５０％ Ａ、１.００分で８０％ Ａ、そして１.０１〜２.００分で５％ Ａである。その流速は、０.３mL／分であり、またその流量は、０.００〜０.５０分、そして再び１.２０〜２.００分まで廃棄に転用される。]
[0114] モニターした多重反応モニタリング（ＭＲＭ）遷移は、２２eＶの衝突エネルギーおよび２.１×１０−３ミリバール(mbar)のＡrの衝突セル圧で、ＦＰＰに関して３８１−＞７９−、またＦＳＰＰに関して３９７−＞１５９−である。１遷移あたりの滞留時間は、０.４Ｄaのスパンで４００ミリ秒(msec)である。チャネル間遅延およびスキャン間遅延は両方とも０.０２秒(sec)である。他の質量分析操作パラメーターは、キャピラリー２.０kＶ；コーン３５Ｖ；抽出器２.０Ｖ；源温 １００℃；脱溶媒和ガス温度２５０℃；脱溶媒和ガス流量６５０Ｌ／時間；コーンガス流量 ２５Ｌ／時間；増倍管６５０Ｖである。]
[0115] １試料あたりの総サイクル時間は２.５分である。その分析は、３８４ウェルのプレートに関してフォーマットされることから、１枚のプレートは１６時間で分析される。クロマトグラムは、クアンリンクス(Quanlynx)ソフトウェアを使用して処理され、これは、個々のＦＰＰピークの領域をＦＳＰＰピーク（内部標準）の領域で割る。その結果得られる値は、対応する試料ウェルに関する相対感度として報告される。]
[0116] ＦＰＰＳアッセイ手順
３８４ウェルのプレートの各々のウェルに、２０％ＤＭＳＯ／水中の化合物５μLを入れる。ＦＰＰＳ（アッセイ緩衝液で１〜８００００に希釈した。）１０μLを各々のウェルに加えて、化合物と共に５分間予めインキュベートしておく。次いで、その時点で、ＧＰＰ／ＩＰＰ（アッセイ緩衝液中、各々、５μＭ）２５μLを加えて、反応を開始させる。３０分後、その反応を２％ＤＭＩＰＡ／ＩＰＡ中の２μＭＦＳＰＰ １０μLの添加により停止させる。次いで、ボルテックス混合を使用して、その反応混合物をn−ペンタノール５０μLで抽出する。相分離後、上（n−ペンタノール）層２５μLを新たな３８４ウェルのプレートに移して、真空遠心分離機を使用して、ペンタノールを蒸発させる。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法による分析のために、その乾燥残渣を０.１％ ＤＭＩＰＡ／水５０μLでもどす。]
[0117] ＦＳＰＰは、質量スペクトルに関する内部標準として使用される。リン酸部分は、スペクトルにおいて(Ｍ−Ｈ)−イオンを基準ピークとして発生させる。]
[0118] この試験システムにおいて、本発明の化合物は、好ましくは、０.８〜１０nＭ、好ましいものは、好ましくは、０.９〜３.３nＭの範囲内（例えば、[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸での実験の場合には、２.４〜３.１nＭの範囲内）のＩＣ５０を有する。とりわけ、それら、例えば、[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸は、先行技術での化合物に対して驚くべき優位性を示す。ＩＣ５０測定に関するアッセイの有用性は、ＦＰＰＳの既知のビスホスホネート阻害剤であるゾレドロン酸を使用して確認される。]
[0119] 本発明のデポ剤、塩および結晶形、さらにはまた、組成物は、十分に耐容性である。
本発明はまた、特許請求の範囲が参照することにより本明細書中に組み込まれることから、該特許請求の範囲、とりわけ従属クレームに記す態様、さらにはまた、とりわけ、次の実施例に与える本発明の態様にも関する。]
[0120] 要約書もまた、参照することにより本明細書中に組み込まれ、そしてまた、本発明の態様を開示している。]
[0121] 式Ｉの化合物の一般的な製造：
式Ｉの化合物は、種々の化合物に関して、当業界で知られている方法により製造することができる。例えば、少なくとも得られる新規生成物および／または使用する新規遊離体(educt)に基づき、新規工程は、式II：



［式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉの化合物に関して定義した通りである。］
のカルボン酸化合物をオキシハロゲン化リンと反応させて、式Ｉの化合物またはその塩を得ること、また所望により、得られる式Ｉの遊離化合物をその塩へと変換すること、得られる式Ｉの化合物の塩を遊離化合物へと変換すること、および／または得られる式Ｉの化合物の塩をその種々の塩へと変換することを含むのが好ましい。]
[0122] オキシハロゲン化リンとして、オキシ塩化リン（ＰＯＣl３）がとりわけ好ましい。その反応は、好ましくは、通常の溶媒または溶媒混合物中、例えば、トルエンといったような芳香族炭化水素中、好ましくは、例えば、５０℃〜反応混合物の還流温度（例えば、（約）８０〜（約）１２０℃）の範囲内の高温で行う。]
[0123] 式IIの出発物質は、例えば、好ましくは、適当な酸、例えば、塩酸といったようなハロゲン化水素酸の存在下、好ましくは、水といったような水性溶媒の存在下、式III：



［式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉの化合物に関して定義した通りであり、またＲは、非置換または置換アルキル、とりわけ低級アルキルまたはフェニル−低級アルキルである。］
の化合物を、好ましくは、例えば、（約）５０〜（約）１００℃（例えば、８０〜１００℃）の範囲内の高温でケン化することにより得ることができ、式IIの化合物またはその塩を与える。]
[0124] 式IIIの化合物は、例えば、好ましくは、適当な溶媒または溶媒混合物、例えば、テトラヒドロフラン(tetrahydrofurane)といったような環状エーテル中、好ましくは、アルカリ金属アルコラート、とりわけカリウムtert−ブチレートといったような強塩基の存在下、式IV：



［式中、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉの化合物に関して定義した通りである。］
のイミダゾール化合物を、好ましくは、（約）−１０〜（約）８０℃（例えば、２０〜３０℃）の範囲内の温度で、式Ｖ：



［式中、Ｒは、式IIIの化合物に関して定義した通りであり、またＸはハロゲン、とりわけ、フルオロ、クロロ、ヨード、またはとりわけ、ブロモ、低級アルカンスルホニルオキシもしくはトルエンスルホニルオキシである。］
のエステルと反応させることにより得ることができる。必要ならば、その結果得られる式IIIの化合物の混合物（ここで、一方の化合物では、Ｒ１がＣ２−Ｃ５−アルキルであって、Ｒ２が水素であり、他方では、Ｒ２がＣ２−Ｃ５−アルキルであって、Ｒ１が水素である。）は、例えば、クロマトグラフ法、分画(differential)結晶化等により分離することができる。]
[0125] 式IVおよびＶの出発物質、さらにはまた、これまでのところ記載していない使用する他のいずれかの出発物質は、当業界で知られている方法、またはそれに類似した方法により得ることができ、市販されており、および／または本明細書中に記載する方法と同様に製造することができる。]
[0126] 次の実施例は、その範囲を限定することなく、本発明を説明するのに役立つ。
次の式Ｉの化合物は、次の参考例に記載するようにして得られる。
特に言及されなければ、温度はセ氏温度（℃）で記す。温度が言及されていないとき、その反応または他の方法段階は室温で行う。]
[0127] 略語：]
[0128] ４−および５−エチルイミダゾールおよび他の全てのイミダゾール誘導体は、D. Horneら, Heterocycles, 1994, Vol. 39, No. 1, p.139-153により製造される。]
[0129] 参考例１：[２−(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸（以下、化合物Ａまたは化合物Ａともまた名付けられている。）
窒素下、(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸６５０mg（３.３８mmol）を室温でトルエン１５mlに溶解する。Ｈ３ＰＯ３ ８５２mg（３mmol）を加えて、その混合物を８０℃まで加熱する。ＰＯＣl３ ０.９３６ml（３mmol）を滴加する。その結果得られる混合物を１２０℃まで加熱して、一晩撹拌する。溶媒を傾捨し、６Ｎ ＨＣl １５mlを加えて、その混合物を還流温度で３時間加熱する。]
[0130] その結果得られる淡黄色の溶液を真空下に濃縮する。アセトン（２５ml）で希釈した後、灰色の固形物質が形成されるまで、その混合物をアセトン（５×２５ml）と共にしっかり撹拌する。その灰色の固形物質を高真空下に乾燥させて、ＥtＯＨ／水から結晶化させて、標記化合物を得る。
HPLC-MS:t=0.31分, (M-H)-=299;1H-NMR(D2O/NaOD):δ=1.07(t, 3H), 2.53(q,2H), 4.45(t, 2H), 7.08(s, 1H), 8.40(s, 1H), 31P-NMR(D2O/NaOD):δ=15.04 ppm。]
[0131] 合成概要：]
[0132] ＨＰＬＣ−ＭＳ条件：]
[0133] 出発物質は、次のようにして製造される。
段階１：(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステルおよび(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステル
窒素下、４−エチルイミダゾール５.０２ｇ（５０mmol）を室温でＴＨＦ １００mlに溶解する。ＫＯtＢu ５.９ｇ（５２mmol）を加えて、その反応物を室温で２時間撹拌する。ブロモ酢酸エチル６.３ml（５５mmol）を３０分間かけて滴加して、その結果得られる混合物を室温で２.５時間撹拌する。Ｈ２Ｏ ２０mlおよびＡcＯＥt １３０mlを加え、有機層を分離して、水層を再びＡcＯＥt １００mlで２回洗浄する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭgＳＯ４で乾燥させて、真空下に濃縮する。その反応物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＭeＯＨ／塩化メチレン）により精製して、(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステルおよび(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステルを各々得る。
(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステル：ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.６０分；１００面積％、ＭＨ＋＝１８３；1H-NMR(d6-DMSO)δ=1.09(t, 3H), 1.18(t, 3H), 2.43(q,2H), 4.13(q,2H), 4.83(s, 2H), 6.78(s, 1H), 7.43(s, 1H)。
(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステル：ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.７２分、１００面積％、ＭＨ＋＝１８３；1H-NMR(d6-DMSO):δ=1.12(t, 3H), 1.18(t, 3H), 2.40(q,2H), 4.14(q,2H), 4.85(s, 2H), 6.61(s, 1H), 7.48(s, 1H)。]
[0134] 段階２：(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸
(４−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステル１.７ｇ（９.５mmol）を４Ｎ ＨＣl ４７ml（１９０mmol）に溶解して、その混合物を還流温度まで加熱する。２時間後、その混合物を室温まで冷却して、溶媒を真空下に除去する。その結果得られる生成物をさらに精製することなく使用する。
ＭＳ：ＭＨ＋＝１５５、1H-NMR(DMSO):δ=1.18(t, 3H), 2.65(q,2H), 5.07(s, 2H), 7.43(d,1H), 9.0(d,1H)。]
[0135] 参考例２：[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸
[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸は、先に概要を述べた合成により、実施例１における段階１の第二生成物である、対応する(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−酢酸エチルエステルから合成される。



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.３２分、(Ｍ−Ｈ)−＝２９９；1H-NMR(D2O/NaOD):δ=1.10(t, 3H), 2.63(q,2H), 4.43(t, 2H), 6.95(s, 1H), 8.54(s, 1H), 31P-NMR(D2O/NaOD):δ=14.96ppm。
先に記載した手順と同様に、次の化合物を製造する。]
[0136] 参考例３：[２−(４−プロピル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.４４分、(Ｍ−Ｈ)−＝３１３.１；1H-NMR(D2O/NaOD):δ=0.78(t, 3H), 1.52(m, 2H), 2.52(t, 2H), 4.50(t, 2H), 7.13(s, 1H), 8.45(s, 1H);31P-NMR(D2O/NaOD)δ=15.25ppm。]
[0137] 参考例４：[２−(５−プロピル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.４６分、(Ｍ−Ｈ)−＝３１３.１；1H-NMR(D2O/NaOD):δ=0.81(t, 3H), 1.51(m, 2H), 2.60(t, 2H), 4.44(t, 2H), 6.96(s, 1H), 8.54(s, 1H);31P-NMR(D2O/NaOD)δ=15.06ppm。]
[0138] 参考例５：[２−(４−ブチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.５６分、(Ｍ−Ｈ)−＝３２７.２；1H-NMR(D2O/NaOD):δ=0.73(t, 3H), 1.17(m, 2H), 1.46(m, 2H), 2.51(t, 2H), 4.44(t, 2H), 7.09(s, 1H), 8.40(s, 1H);31P-NMR(D2O/NaOD):δ=14.98ppm。]
[0139] 参考例６：[２−(５−ブチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.４４分、(Ｍ−Ｈ)−＝３２７.２；1H-NMR(D2O/NaOD):δ=0.79(t, 3H), 1.27(m, 2H), 1.51(m, 2H), 2.67(t, 2H), 4.49(t, 2H), 6.99(s, 1H), 8.58(s, 1H);31P-NMR(D2O/NaOD):δ=15.16ppm。]
[0140] 参考例７：[１−ヒドロキシ−２−(４−イソプロピル−イミダゾール−１−イル)−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.４２分、(Ｍ−Ｈ)−＝３１３；1H-NMR(d6-DMSO):δ=1.13, 1.15(d,6H), 2.86-2.95(m, 1H), 4.49(t, 2H), 7.12(s, 1H), 8.46(s, 1H);31P-NMR(d6-DMSO):δ=15.35ppm。]
[0141] 参考例８：[１−ヒドロキシ−２−(５−イソプロピル−イミダゾール−１−イル)−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.４０分、(Ｍ−Ｈ)−＝３１３；1H-NMR(d6-DMSO):δ=1.10, 1.12(d,6H), 3.12-3.19(m, 1H), 4.52(t, 2H), 7.01(s, 1H), 8.56(s, 1H);31P-NMR(d6-DMSO):δ=15.24ppm。]
[0142] 参考例９：{２−[４−(１−エチル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル}−ホスホン酸



ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｔ＝０.５５分、(Ｍ−Ｈ)−＝３４１；1H-NMR(d6-DMSO):d=0.80(m, 6H), 1.50-1.75(m, 4H), 2.49-2.60(m, 1H), 4.52(bs, 2H), 7.40(s, 1H), 8.90(s, 1H)。]
[0143] 参考例１０：{２−[５−(１−エチル−プロピル)−イミダゾール−１−イル]−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル}−ホスホン酸



1H-NMR(d6-DMSO):d=0.77(m, 6H), 1.40-1.60(m, 4H), 2.97(t, 1H), 4.44(t, 2H), 6.60(s, 1H), 7.92(s, 1H)。]
[0144] 実施例１：
Ｃa−[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸塩（１：２）に関する製造方法
[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸３.５ｇ（１１.６７mmol）を９０℃で脱イオン水５４０mlに溶解する。この溶液に、水１０ml中の塩化カルシウム６６７mg（５.８３mmol）の９０℃の熱溶液を１分以内に加える。その反応混合物を１４時間かけて２０℃まで冷却して、その懸濁液を濾過する。固形物質を氷水２×５０mlで洗浄して、６０℃および５ミリバール(mbar)で乾燥させる。カルシウム−[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸塩（１：２）を得る。]
[0145] 実施例２：
Ｚn−[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸塩（１：２）に関する製造方法
[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸３.５ｇ（１１.６７mmol）を９０℃で脱イオン水５４０mlに溶解する。この溶液に、水１０ml中の塩化亜鉛８１１mg（５.８３mmol）の９０℃の熱溶液を１分以内に加える。その反応混合物を２０℃まで冷却して、６０℃で乾燥させて、亜鉛−[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸塩（１：２）を得る。]
[0146] 実施例３：
実施例１および２から得られる塩の微粒子化、またその微粒子化塩を用いての本発明による微粒子の製造
ａ）微粒子化
（ｉ）粉砕
実施例１の乾燥カルシウム塩および実施例２の乾燥亜鉛塩をセラミック製エアージェットミル（５バールの粉砕ガス圧）で粉砕する。
（ii）得られる粒子
カルシウム塩の粉砕前、その粒子は約１５０μmまでの粒径を有する。粉砕後、顕微鏡検査により、その粒子は１０μmより小さい粒径を有する。
亜鉛塩の場合、粉砕前、その粒子は約１００μmまでの粒径を有する。粉砕後、その粒子は５μm以下の粒径を示す。]
[0147] ｂ）微粒子の製造
０.３８dL／ｇの固有粘度をもつＰＬＧＡ ５０：５０（ラクテル(Lactel)（商標））３.１ｇをジクロロメタン１５.５mLに溶解すると、透明な２０％（ｍ／Ｖ）ＰＬＧＡ溶液を形成する。氷水浴中で冷却しながら、高剪断力ミキサー（ウルトラ−タラックス(Ultra Turrax)、Ｓ２５Ｎ−１０Ｇ）を２０,０００rpmで４分間使用して、実施例１から得られるＣa−[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸（１：２）塩０.９ｇ（遊離酸のアッセイ８９.０％）をＰＬＧＡ溶液へと分散させる。その結果得られる懸濁液を有機相と呼ぶ。]
[0148] ポリビニルアルコール１８−８８（以下、ＰＶＡ）２５ｇ、酢酸ナトリウム三水和物１１.３ｇおよび氷酢酸２５.０ｇを水５Ｌに溶解する。この０.５％ ＰＶＡ−１００mＭ緩衝酢酸溶液（pＨ ４）を水相と呼ぶ。
２つの流入口と１つの流出口をもつインライン高剪断力装置によって、３０：６００mL／分の流速比で、また３８００rpmで、有機相を水相と混合する。その結果得られる乳濁液を、プロペラ撹拌機を用いて４００rpmで撹拌しながら、開始容量１７０mLの水相が既に入っている二重壁反応器に集める。]
[0149] ジクロロメタンを蒸発により除去するが、これは、バッチを４００rpmで連続的に撹拌すること、そのバッチを５時間以内に５０℃まで徐々に加熱すること、この温度をさらに２時間維持することにより促進される。この時間中ずっと、真空を使用して、乳濁液の表面付近のガス相を交換する。]
[0150] 再び室温まで冷却した後、形成された微粒子は１２時間で沈降する。上澄みを除去して、大きく広げる。その微粒子を再び残りの上澄みに再懸濁させて、５μm以上を濾過により単離する。その微粒子を水約５０mLで４回洗浄して、真空下に３日間乾燥させる。最後に、１４０μmのメッシュサイズを通して篩にかけることにより、乾燥させた微粒子を脱凝集する。微粒子２.３２ｇを微細な白色粉末として得る。電子顕微鏡像は、滑らかな表面の完全に球形の粒子を示した。微粒子径分布は、レーザー光回折により次のように見い出された：×１０：１５.６μm、×５０：３５.８μm、×９０：５３.７μm。１４.７％の原体アッセイは、ＨＰＬＣにより見い出され、これは、７４％のカプセル化効率に対応する。２４時間後、３７℃でpＨ ７.４の緩衝液中、原体の１.９％だけがインビトロでの放出試験において放出されるが、これは、この製剤が早過ぎる放出を有利に回避することを示す。]
[0151] 次の表は、実施例１の重要な製剤、工程および分析データ、並びに実施例１と同様にして製造される[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸塩（組成は表を参照。）微粒子のさらなる実施例２−４に関する重要な製剤、工程および分析データを要約する。]
[0152] ]
[0153] ＤＳは原体を表し、Ｌ：Ｇは、コモノマーにおける乳酸：グリコリドのモル比を表す。実施例１および３では、Lactel（商標）をＰＬＧＡとして使用し、実施例２および４では、Resomer（商標）ＲＧ ７５３ Ｓを使用する（先の表IIを参照。）。]
[0154] これは、この場合、実施例３ＡのＣa塩微粒子製剤が、式Ｉの化合物を、１日目には非常に低くしか放出せず、また２１日目までは６０％未満しか放出しないという、最も有利な放出動態を示すことを明確に示す。]
[0155] 走査型電子顕微鏡像（その試料を金−白金でスパッタして、実施例３Ａ、３Ｂ、３Ｃおよび３Ｄの製剤の微粒子を走査型電子顕微鏡法により調査する。）を使用して、Ｚn塩粒子（実施例３Ｃおよび３Ｄ）の場合、原体は、どうやら全くまたはごく僅かな程度にしかカプセル化されないようであることが明らかとなる：原体粒子は、その粒子の表面上で観察され得て、原体は、ポリマーマトリックスの断面では全く見られ得ない。表面表現に関しては、その微粒子を適当なオブジェクトホルダーに移し、２０nmの金でスパッタして、走査型電子顕微鏡（Camscan ＣＳ ２４／ＥＯ、Ｉd. Ｇ.１６.ＭＩＫ.Ｓ００８）で調べる。断面図に関しては、その粒子をAraldite Ｆ（Ciba Specialty Chemicals、バーゼル、スイスの商標；エポキシ樹脂）に包埋して、半薄切片（厚さ約１μm）を切断することにより、断面を作成する。その切片を金でスパッタして、ＳＥＭでもまた調べる。]
[0156] 対照的に、Ｃa塩微粒子（実施例３Ａ、３Ｂ）の像は、Ｚn塩と比べて、より有効な(efficous)カプセル化を実証する。しかしながら、幾つかの原体粒子はまだなお、ＰＬＧＡ ７５：２５の製剤（実施例３Ｂ）の表面で見られ得て、これは、高いバースト効果（最初の２４時間放出が高いこと）を説明する。対照的に、ＰＬＧＡ ５０：５０であるＣa塩製剤は、その表面に原体を全く示さない。粒子の断面において、その原体粒子が観察され得る。]
[0157] 実施例４：
皮下投与後のラットにおける化合物Ａ微粒子のカルシウム塩の耐容試験
実施例３Ａの微粒子を、カルボキシメチルセルロースナトリウム、Ｄ−マンニトール、Pluronic Ｆ６８（商標）（ポロクサマー１８８、エチレンオキシドおよびプロピレンオキシドのコポリマー、ＢＡＳＦ社、ルートウィヒスハーフェン、ドイツ）および注射用水を含む媒体に懸濁させる。これらの懸濁液２００マイクロリットルを８週齢の雌の処女ウィスター系ラット（体重約２２０ｇ）の左背面の剪毛した皮膚に皮下注射した。この方法では、カルシウム−化合物Ａ微粒子（実施例３Ａ）の１mg用量（動物あたり）および２mg用量（動物あたり）を１グループ６匹の動物に適用する。皮膚の厚さは、注射面および反対側の非注射面でマイクロキャリパーにより測定されるであろう。参照として、非カプセル化原体の懸濁液を６０マイクログラムの用量で注射する。加えて、ＰＬＧＡ ５０：５０から作られたプラセボ微粒子もまた対照として注射する。]
[0158] 本発明による微粒子製剤により、刺激が全く引き起こされないかどうかが示され得る。]
[0159] 実施例５：
化合物Ａ−カルシウム塩を用いてのインプラントの製造
微粒子化カルシウム塩である化合物Ａ（１：２塩）１.５ｇおよびＰＬＧＡ ５０：５０（IV ０.６５dL／ｇ）１０.７ｇを液体窒素中で凍結粉砕すること(cryo-milling)によって完全に混合する。その結果得られる微細な粉末をラム押出機によって５mm／分の速度で９０℃にて押し出す。直径１.５mmのインプラントを長さ２cmに切断する。そのインプラントをアプリケーターに入れ、アルミ箔で密封して、最後に、γ線照射を３０kＧyの用量で使用することにより滅菌する。]
[0160] 次の実施例において、Ｘ線粉末回折パターンは、ブルカー(Bruker) Ｄ８アドバンスト・シリーズ(Advanced Series) ２回折計、検出器：Ｃu Ｋα（１.５４Å）の放射線照射を用いてのＰＳＤバンテック(Vantec)−１で測定する。パラメーターは、各々、実施例に記載する通りである。]
[0161] 実施例６：
遊離型（内部双性イオン塩の形態）での化合物Ａの結晶
（参考例１でのようにして得ることができる）化合物Ａの双性イオン塩のＸ線回折図(diffractogram)を得て（元素分析Ｃ ２７.９％（２８.０）、Ｈ ４.６％（４.７）、Ｎ ９.４％（９.３％）、Ｐ ２０.５％（２０.６％）（括弧内は理論値））、次のピークを与える（図１もまた参照。）。



タイプ：２Ｔh 固定 −開始：２.０００°−終了：４０.０３０°−ステップ：０.０１７°−ステップ時間：１０７.秒 −温度：２５℃（室温）−開始した時間：０秒 −２シータ：２.０００°。
双性イオン型の融点（m.p.）は２３７℃である。] 図１
[0162] 実施例７：
Ｃa塩（１：２）の形態での化合物Ａの結晶
ａ）１：２カルシウム塩である化合物Ａ（１当量のＣa：２当量の化合物Ａ）の結晶形を製造するための方法：
機械式撹拌機を備えた１０００mLの三つ口フラスコ中、化合物Ａ ３.５ｇおよび水５４０mLを加える。全てが溶液となるまで、この混合物を約９０℃に加熱する。この透明な溶液に、水１０mL中の塩化カルシウム二水和物６６７mgの溶液を加える。白色の沈殿物が現れた後、その混合物を室温まで冷却して、一晩撹拌する。次いで、沈澱したＣa塩を濾過により単離し、冷水で洗浄して、真空オーブン中、６０℃で一晩乾燥させる。これは、二水和物に対応する組成物のＣa塩である（m.p.＞２３０℃）。その塩のＣa含量は５.８％（理論的には５.９％）である。]
[0163] ここで、化合物Ａのカルシウム塩は、１つのカルシウムに対し２つの化合物Ａ分子という化学量論を有する。]
[0164] ｂ）ａ）の下に得ることができるような化合物ＡのＣa塩のＸ線回折図(diffractogram)は、次のピークを与える（図２もまた参照。）。



タイプ：２Ｔh 固定 −開始：２.０００°−終了：４０.０３０°−ステップ：０.０１７°−ステップ時間：１０７.秒 −温度：２５℃（室温）−開始した時間：０秒 −２シータ：２.０００°。] 図２
[0165] 実施例８：
Ｚn塩（１：２）の形態での化合物Ａの結晶
ａ）１：２亜鉛塩である化合物Ａ（１当量のＺn：２当量の化合物Ａ）の結晶形を製造するための方法：
機械式撹拌機を備えた１０００mLの三つ口フラスコ中、化合物Ａ ３.５ｇおよび水５４０mLを加える。全てが溶液となるまで、この混合物を約９０℃に加熱する。この透明な溶液に、水１０mL中の塩化亜鉛８１１mgの溶液を加える。白色の沈殿物が現れた後、その混合物を室温まで冷却して、一晩撹拌する。次いで、沈澱したＺn塩を濾過により単離し、冷水で洗浄して、真空オーブン中、６０℃で一晩乾燥させる。これは、二水和物に対応する組成物でのＺn塩である（m.p.＞２３０℃）。その塩のＺn含量は約９.０％（理論的には９.３％）である。
ここで、化合物Ａの亜鉛塩は、１つの亜鉛に対し２つの化合物Ａ分子という化学量論を有する。]
[0166] ｂ）ａ）の下に得ることができるような化合物ＡのＺn塩のＸ線回折図(diffractogram)は、次のピークを与える（図３もまた参照。）。



タイプ：２Ｔh 固定 −開始：２.０００°−終了：４０.０３０°−ステップ：０.０１７°−ステップ時間：１０７.秒 −温度：２５℃（室温）−開始した時間：０秒 −２シータ：２.０００°。] 図３
[0167] 実施例９：
Ｍg塩（１：２）の形態での化合物Ａの結晶
ａ）１：２マグネシウム塩である化合物Ａ（１当量のＭg：２当量の化合物Ａ）の結晶形を製造するための方法：
磁気式撹拌機を備えた２０mLのバイアル中、化合物Ａ ７４.２０mgおよび水１５mLを加える。全てが溶液となるまで、この混合物を約９０℃に加熱する。この透明な溶液に、水２４mL中の塩化マグネシウム１１.８mgの溶液を加える。白色の沈殿物が現れた後、その混合物を室温まで冷却して、一晩撹拌する。次いで、沈澱したＭg塩を遠心分離により単離して、真空オーブン中、４０℃で一晩乾燥させる。これは、二水和物に対応する組成物のＭg塩を与える（m.p.＞２３０℃）。その塩のＭg含量は約３.４％（理論的には３.７％）である。
ここで、化合物Ａのマグネシウム塩は、１つのマグネシウムに対し２つの化合物Ａ分子という化学量論を有する。]
実施例

[0168] ｂ）ａ）の下に得ることができる化合物ＡのＭg塩のＸ線回折図(diffractogram)は、次のピークを与える（図４もまた参照。）。



タイプ：２Ｔh 単独 −開始：２.０００°−終了：４０.０３０°−ステップ：０.０１７°−ステップ時間：０.３秒 −温度：２５℃（室温）−開始した時間：０秒 −２シータ：２.０００°。] 図４

权利要求:

請求項1
式Ｉ：［式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であって、他方は、水難溶性塩の形態である分岐しているまたは分岐していないＣ１−Ｃ５−アルキル（好ましくは、Ｃ２−Ｃ５−アルキル）である。］のビスホスホネート化合物の水難溶性塩、およびポリマーマトリックスを含むデポ剤（この用語には、インプラントが含まれる。）。
請求項2
微粒子の形態での、請求項１に記載のデポ剤。
請求項3
式Ｉの化合物が[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸である、請求項１に記載のデポ剤。
請求項4
水難溶性塩が、亜鉛、マグネシウム、またはとりわけカルシウム塩である、請求項１〜３のいずれかに記載のデポ剤。
請求項5
ポリマーマトリックスが直鎖状または分岐鎖状のポリラクチド−コ−グリコリドを含む、請求項１〜４のいずれかに記載のデポ剤。
請求項6
界面活性剤、空隙率影響物質(porosity influencing agent)および／または塩基性塩をさらに含む、請求項５に記載のデポ剤。
請求項7
請求項１〜６のいずれかに記載のデポ剤、並びに湿潤剤、とりわけポロクサマーおよび／またはポリオキシエチレン−ソルビタン−脂肪酸エステルを含有する水性媒体を含む医薬組成物。
請求項8
媒体が等張化剤を含む、請求項７に記載の組成物。
請求項9
媒体が粘度増加物質を含む、請求項７に記載の組成物。
請求項10
請求項１に記載のデポ剤および水性媒体を含むキット。
請求項11
請求項１〜１０のいずれかに記載の微粒子。
請求項12
遊離または溶媒和物の形態での、式Ｉ：［式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であって、他方は、水難溶性塩、とりわけ、亜鉛、マグネシウム、またはさらにとりわけカルシウム塩の形態である分岐しているまたは分岐していないＣ１−Ｃ５−アルキル（好ましくは、Ｃ２−Ｃ５−アルキル）である。］の化合物の水難溶性塩。
請求項13
カルシウム塩であり、とりわけ、Ｃa：式Ｉの化合物の化学量論が１：２である、式Ｉの[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸の請求項１２に記載の塩。
請求項14
遊離または溶媒和物の形態での、式Ｉ：［式中、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であって、他方は、遊離型であるか、または水難溶性塩、とりわけ、亜鉛、マグネシウム、もしくはさらにとりわけカルシウム塩の形態である分岐しているまたは分岐していないＣ１−Ｃ５−アルキル（好ましくは、Ｃ２−Ｃ５−アルキル）である。］の化合物の結晶形であって、さらにとりわけ、次のように定義される結晶形のグループ：[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸の遊離双性イオン型の結晶形、これは、とりわけ、図１に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：１０.５、１３.１、１４.７、１７.２、２３.５、２５.２、３４.４（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、遊離双性イオン型での化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す；１つのカルシウムに対し２分子の化合物Ａという化学量論をもつ（とりわけ、二水和物といったような水和物の形態での）[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸のカルシウム塩の結晶形、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図２に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：７.９、１０.６、１２.１、２５.７、２７.４、２９.２（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、カルシウム１：２塩である化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す；１つの亜鉛に対し２分子の化合物Ａという化学量論をもつ（とりわけ、二水和物といったような水和物の形態での）[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸の亜鉛塩の結晶形、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図３に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：６.７、９.５、１２.５、１７.７、２７.３（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、亜鉛１：２塩である化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す；および１つのマグネシウムに対し２分子の化合物Ａという化学量論をもつ（とりわけ、二水和物といったような水和物の形態での）[２−(５−エチル−イミダゾール−１−イル)−１−ヒドロキシ−１−ホスホノ−エチル]−ホスホン酸のマグネシウム塩の結晶形、これは、さらに好ましくは、とりわけ、図４に示すように、屈折角２シータ（θ）で、次のピーク：６.７、１２.５、２０.０、２７.３（各々、±０.２）の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらに好ましくは３つ、最も好ましくは全てを含むＸ線粉末回折パターンを有するか；あるいはまた、マグネシウム１：２塩である化合物Ａの少なくとも８０重量％は、そのようなＸ線粉末回折パターンを示す；から選択される結晶形。
請求項15
骨代謝回転異常が見られる疾患または障害の処置および予防の方法であって、そのような処置を必要とする患者に、請求項１〜６のいずれかに記載のデポ剤、請求項７〜９のいずれかに記載の組成物、請求項１０に記載のキット、請求項１２もしくは請求項１３に記載の微粒子、または請求項１４に記載の結晶形を治療上有効な投薬量で投与することを含む方法；そのような疾患または障害の処置のための薬物の製造における、請求項１〜６のいずれかに記載のデポ剤、請求項７〜９のいずれかに記載の組成物、請求項１０に記載のキット、請求項１２もしくは請求項１３に記載の微粒子、または請求項１４に記載の結晶形の使用；該障害または疾患の処置における、請求項１〜６のいずれかに記載のデポ剤、請求項７〜９のいずれかに記載の組成物、請求項１０に記載のキット、請求項１２もしくは請求項１３に記載の微粒子、または請求項１４に記載の結晶形、あるいはそのような処置における使用のための、請求項１〜６のいずれかに記載のデポ剤、請求項７〜９のいずれかに記載の組成物、請求項１０に記載のキット、請求項１２もしくは請求項１３に記載の微粒子、または請求項１４に記載の結晶形を含む医薬品製剤。